分光光度計是用不連續的波長采樣反射物體或透射物體的一種測量儀器。由于不同物體分子的結構不同，對不同波長光線的吸收能力也不同，因此，每種物體都具有特定的吸收光譜。能從含有各種波長的混合光中，將每一種單色光分離出來，并測量其強度的儀器叫做分光光度計。
由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點是放大倍數大，因而可以用于檢測微弱光電信號，而不能用來檢測強光。否則容易產生信號漂移，靈敏度下降。針對其上述特點，在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下，因此在預熱時，應打開比色皿蓋或使用擋光桿，避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩。
分光光度法是比色法的發展。比色法只限于在可見光區，分光光度法則可以擴展到紫外光區和紅外光區。分光光度法則要求近于真正單色光，其光譜帶寬最大不超過3－5nm，在紫外區可到1nm以下，來自棱鏡或光柵，具有較高的精度。
使用與維護
1、若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。
2、指針式儀器在未接通電源時，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進行機械調零。
3、比色皿使用完畢后，請立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
4、操作人員不應輕易動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光信號，使該光線入射樣品。對于生物、化學分析，測試光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣 品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比；對于光學薄膜分析，測試光源透過或被樣品表面反射，根據對傳感器接收到的信號進行分析，從而得到薄膜對某一段波長的透過率、反射率，通過其它算法，亦可得到鍍膜的色彩、膜厚等數據。
