紫外可見分光光度計是一種廣泛應用于化學、生物、醫藥等領域的精密分析儀器，它能夠測量樣品在紫外和可見光譜區域內的吸收或透射特性。校準是確保分光光度計測量準確性的關鍵步驟，以下是關于紫外可見分光光度計校準方式的描述：
1. 選擇合適的標準物質
- 標準溶液：選擇與儀器波長范圍相匹配的標準溶液，如在紫外區域常用的硝酸鉀溶液，在可見區域常用的重鉻酸鉀溶液。
- 純度要求：標準物質應具有高純度，以減少雜質對校準結果的影響，并確保其穩定性和可追溯性。
2. 準備標準溶液
- 準確稱量：使用精密天平準確稱量所需標準物質，并按照推薦濃度準確配制溶液。
- 適宜溶劑：選擇適宜的溶劑溶解標準物質，確保溶劑對測定無干擾，并保證溶液的穩定性。
3. 檢查儀器性能
- 光源檢查：確保儀器光源穩定，對于使用氘燈和鎢燈的分光光度計，檢查燈源是否穩定，并確保燈源壽命足夠。
- 光路清潔：檢查儀器光路是否清潔，鏡片、分光器等光學元件表面無塵埃、污漬。
4. 波長校準
- 使用標準燈：利用具有特征發射譜線的標準燈(如汞燈、氘燈)，進行波長的準確性校準。
- 校正偏移：如果檢測到波長偏移，應根據儀器說明書調整波長刻度，確保波長讀數的準確性。
5. 光度準確度校準
- 透光率校準：使用透光率接近100%的樣品(如純凈溶劑)進行基線校正，確保透光率讀數的準確性。
- 吸光度校準：使用標準溶液進行吸光度校準，調整儀器的吸光度讀數，使其與標準溶液的已知吸光度一致。
6. 基線穩定性檢查
- 基線漂移：在沒有樣品的情況下，全波段掃描，檢查基線是否平穩，若基線漂移過大，需檢查儀器性能。
- 溫度影響：確保儀器所在環境溫度穩定，因為溫度波動可能導致基線漂移。
7. 重復性和線性檢查
- 重復性測試：多次測量同一標準溶液，檢查測量結果的重復性，確保儀器的測量精度。
- 線性范圍：使用不同濃度的標準溶液，檢查儀器在不同濃度下的線性響應，確保儀器在整個測量范圍內的線性。
8. 記錄和驗證
- 詳細記錄：記錄校準過程中的所有操作，包括標準溶液的配制、校準結果、儀器參數的調整等。
- 驗證效果：校準后，使用獨立來源的標準溶液進行驗證，確保校準效果滿足測量要求。
9. 定期再校準
- 定期執行：根據儀器使用頻率和制造商建議，定期進行校準，確保儀器始終處于最佳狀態。
- 遇到問題時：若發現測量結果異常或進行了重大維修，應立即進行再校準。
