可見分光光度計是一種常用的分析儀器，用于測量樣品在可見光區的吸光度。為了保證其測量的準確性和可靠性，定期校準是至關重要的。以下是對可見分光光度計校準過程的詳細描述：
一、校準前的準備
1. 環境條件檢查
- 需確保校準環境穩定。溫度應控制在儀器規定的范圍內，通常為 15℃ - 35℃，避免溫度波動過大影響儀器性能。濕度一般要求在 40% - 80%，防止高濕度導致電子元件受潮或出現凝露現象。同時，要將儀器放置在平穩的工作臺上，避免振動干擾。
2. 儀器外觀與清潔檢查
- 仔細檢查儀器外觀，查看是否有損壞、劃痕或松動的部件。特別要注意比色皿架、波長調節旋鈕等部位的完整性。
- 對儀器進行清潔，用干凈的軟布擦拭外殼，去除灰塵和污漬。對于光學部件，如光源燈罩、比色皿架等，要用專門的光學清潔工具輕輕擦拭，防止劃傷光學表面。
二、波長準確性校準
1. 選擇合適的標準物質
- 常用的標準物質有鈥濾光片、鐠釹濾光片等。這些濾光片具有特定的吸收波長，可用于準確校準儀器波長。例如，鈥濾光片在 279.0nm、287.0nm 等波長處有特征吸收峰。
2. 校準操作步驟
- 將標準物質(如鈥濾光片)正確安裝在比色皿架上，注意安裝方向要正確，確保濾光片表面與光路垂直。打開儀器電源，讓儀器預熱一段時間，一般為 15 - 30 分鐘，使儀器達到穩定的工作狀態。
- 通過儀器的操作界面設置掃描波長范圍，使其包含標準物質的特征吸收波長。然后啟動掃描程序，儀器開始測量標準物質在不同波長下的吸光度。
- 掃描完成后，觀察測量得到的吸光度峰值對應的波長是否與標準物質的特征波長相符。如果有偏差，按照儀器的操作手冊進行調整。調整方法可能因儀器型號而異，一般是通過調節波長調節旋鈕或在軟件界面輸入校準系數來進行。
三、吸光度準確性校準
1. 使用標準溶液
- 采用已知濃度和吸光度的標準溶液，如一定濃度的重鉻酸鉀溶液。將標準溶液倒入比色皿中，約 3/4 高度即可。用擦鏡紙擦拭比色皿外壁，避免指紋和污漬影響測量。
2. 吸光度測量與校準
- 將裝有標準溶液的比色皿放入比色皿架，正確定位。在儀器操作界面上設置測量波長，該波長應是標準溶液有明確吸光度值的波長。
- 進行吸光度測量，讀取測量值并與標準溶液的理論吸光度值進行比較。如果存在差異，通過儀器的校準功能進行調整。調整方法可能是對滿度吸光度進行重新設定，或者根據儀器提示輸入校準因子。
